植物蛋白抽提試劑盒說明書
Plant Protein Extraction Kit
Cat. No. K0885
保存:蛋白酶抑制劑混合物:-20℃
其它組分:室溫
組分說明
Catalog no. K0885B K0885C
Kit Size 25 次 100 次
Plant Protein Extraction Reagent 25 ml 100 ml
蛋白酶抑制劑混合物 250 μl 1 ml
產(chǎn)品簡介
本植物蛋白抽提試劑盒可從新鮮、冰凍或干燥植物組織中提取可溶性植物蛋白。適用于多種植物及植物的不同部位(如根、莖、葉、花、種子等)蛋白提取,高效提取植物蛋白,比傳統(tǒng)的方法提取蛋白產(chǎn)量大、活性高、速度快。所提蛋白可直接進行蛋白電泳分析、免疫沉淀、Western Blot、蛋白活性測定及蛋白純化等實驗。所提蛋白可用 BCA蛋白定量試劑盒(#K0014)進行濃度的測定。
注意事項
1. 本品含有1mM EDTA。
2. 本產(chǎn)品適用于提取植物葉子、根等組織蛋白。
3. 為防止蛋白降解,所有的操作盡量在冰上進行。
4. 使用本產(chǎn)品提取后蛋白,可采用BCA 法進行蛋白定量。
5. 為了獲得實驗J效果,請根據(jù)實驗調(diào)整J使用量。
操作步驟
1. 請在蛋白抽提前取出實驗所需蛋白抽提試劑進行預冷, 按照1:99比例加入蛋白酶抑制劑混合物(例如990μl抽提試劑中加入10 μl蛋白酶抑制劑混合物),使蛋白酶抑制劑混合物在抽提試劑中成1×工作液。
注意:在進行蛋白抽提前2-3分鐘內(nèi)加入蛋白酶抑制劑混合物。
2. 稱量試驗植物組織的重量。按照組織:抽提試劑=1:5(g/ml)的比例加入蛋白抽提試劑并勻漿處理(裂解液的使用量依據(jù)植物不同部位的而定)。若需要濃縮的蛋白提取物,可適當減少植物蛋白抽提試劑使用量。
注意:勻漿前將大塊的植物組織剪成小塊,機械勻漿器可選用30,000rpm,勻漿10s,間歇10s,反復三次進行裂解,根據(jù)組織樣本不同選用適合的勻漿方式。
3. 勻漿后冰上孵育20分鐘(冰上放置時間可適當延長至30分鐘)。
4. 4℃ 12,000 rpm,離心20分鐘。
5. 收集上清中的可溶性蛋白,進行下一步的純化或下游分析。
實驗代做服務(wù):
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