男男gay,少妇人妻系列无码专区视频,偷窥日本少妇撒尿Chinese,玖玖视频在线

當前位置:
首頁 > 技術文章 > MDA-MB-436 人乳腺癌細胞傳代/復蘇技巧
目錄導航 Directory
技術支持Article
MDA-MB-436 人乳腺癌細胞傳代/復蘇技巧
點擊次數(shù):374 更新時間:2024-03-04

MDA-MB-436 人乳腺癌細胞

Human Breast Cancer Cells

貨號:YJ-h036(STR鑒定)

價格: 1500.0

規(guī)格: 1*106 

細胞描述

該細胞源于一名43歲患有乳腺腺癌女性的胸腔積液,細胞呈多形性,大多數(shù)細胞在間接免疫熒光染色時呈現(xiàn)與抗微管抗體的強烈反應。

細胞特性

1 來源:人,女性,乳腺腺癌胸水轉移灶

2 形態(tài):有多核成分的多形細胞,貼壁生長

3 含量:>1x10^6  細胞數(shù)

4 規(guī)格:T25瓶或者1mL凍存管包裝

5 用途:僅供科研使用。

運輸和保存

干冰運輸及復蘇好存活細胞

11mL凍存管包裝干冰運輸,收到后-80度冰箱保存過夜后轉入液氮或直接復蘇,若發(fā)現(xiàn)干冰已揮發(fā)干凈、凍存管瓶蓋脫落、破損及細胞有污染,請立即與我們聯(lián)系。

2T25瓶復蘇的存活細胞常溫發(fā)貨,收到后按照細胞接收后的處理方法操作。

細胞接收后的處理:

1)收到細胞后,75%酒精消毒瓶壁將T25瓶置于37℃培養(yǎng)箱放置約2-3h,若發(fā)現(xiàn)培養(yǎng)瓶破損、有液溢出及細胞有污染,請拍照后及時聯(lián)系我們。

2)請在45X顯微鏡下確認細胞狀態(tài),同時給剛收到的細胞拍照(10×20×)各2-3張以及培養(yǎng)瓶外觀照片一張留存,作為售后時收到時細胞狀態(tài)的依據(jù)。

3)貼壁細胞:細胞在37℃培養(yǎng)箱中放置2-3h,顯微鏡下觀察細胞的生長和貼壁情況,有些貼壁細胞在快遞運送過程中會因振動脫落和脫落后成團的情況。若鏡下觀察細胞的生長密度若在60%以下,可去除培養(yǎng)瓶中灌液培養(yǎng)基(若有未貼壁的細胞需要離心回收,重懸打入到原培養(yǎng)瓶中),加入新配制的完全培養(yǎng)基6-8mL,放到細胞培養(yǎng)箱中繼續(xù)培養(yǎng)。若細胞生長密度達70%-80%以上,可以對細胞進行傳代處理。傳代過程中,若因運輸振動脫落的細胞需要離心回收。

4備注:運輸用的培養(yǎng)基(灌液培養(yǎng)基)不能再用來培養(yǎng)細胞,請換用按照說明書細胞培養(yǎng)條件新配制的完全培養(yǎng)基來培養(yǎng)細胞。  收到細胞后第一次傳代建議T25培養(yǎng)瓶12傳代 。 

一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準備:

1) 準備L15 基礎培養(yǎng)基                 YJ-0009                          89%

     優(yōu)質胎牛血清                            YJ-0500                         10%

     P/S青霉素-鏈霉素                     YJ-15140-122                1%

     谷胱甘肽(還原型)                YJ-8180                           16ug/ml

      胰島素                                      YJ-0016-a)                           0.01mg/ml

2)注意事項:

a 該細胞不能用胰酶消化,傳代時,使用細胞刮鏟輕輕把細胞刮下來。抽出細胞液離心后傳到新的培養(yǎng)瓶中。

b L-15培養(yǎng)基配方設計用于與大氣進行自由氣體交換。使用該培養(yǎng)基進行培養(yǎng)時應使用空氣100%CO 2和空氣混合物對細胞有害。如果沒有條件準備空氣氣相100%的培養(yǎng)箱的,可以采用不透氣密封蓋的T25培養(yǎng)瓶來培養(yǎng),培養(yǎng)過程中每天將細胞拿出培養(yǎng)箱換1-2次空氣。

3) 培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,100%; 溫度:37攝氏度,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。

4) 凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配。

二. 細胞處理:

1)凍存細胞的復蘇:

將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,加入到含4-6mL完全培養(yǎng)基的離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心3-5min,棄去上清液,完全培養(yǎng)基重懸細胞。然后將細胞懸液加入含6-8ml完全培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶(或皿)中37℃培養(yǎng)過夜。第二天顯微鏡下觀察細胞生長情況和細胞密度。

2) 細胞傳代:如果細胞密度達70%-90%,即可進行傳代培養(yǎng)。

可以通過將貼壁細胞用細胞刮鏟刮入含有漂浮細胞的培養(yǎng)基中,通過離心收集細胞,將細胞沉淀重懸于新鮮培養(yǎng)基中并分配到新的培養(yǎng)瓶中來對細胞進行傳代。建議收貨后的第一次傳代密度為1:2進行。后續(xù)的傳代可根據(jù)實際情況按1:2~1:4的比例進行。

3) 細胞凍存: 收到細胞后建議在培養(yǎng)前3代時凍存一批細胞種子以備后續(xù)實驗使用。

MDA-MB-436 人乳腺癌細胞.png


下面T25瓶為例;

1. 細胞凍存時按照細胞傳代的過程(使用細胞刮鏟收取細胞)收集細胞到離心管中,可使用血球計數(shù)板計數(shù),來決定細胞的凍存密度。一般細胞的推薦凍存密度為1×10^6~1×107個活細胞/ml.

2. 1000rpm離心3-5min,去掉上清。用配制好的細胞凍存液重懸細胞 ,按每1ml凍存液含1×10^6~1×107個活細胞/ml分配到一個凍存管中將細胞分配到凍存管中,標注好名稱、代數(shù)、日期等信息。

將要凍存的細胞置于程序降溫盒中,-80度冰箱中過夜,之后轉入液氮容器中儲存。同時記錄好凍存管在液氮容器中的位置以便后續(xù)查閱和使用。

注意事項

1.收到細胞后,若發(fā)現(xiàn)干冰已揮發(fā)干凈、凍存管瓶蓋脫落、破損及細胞有污染,請立即與我們聯(lián)系。

2.收到細胞先不開瓶蓋,瓶身擦拭酒精后放在培養(yǎng)箱靜置2-4小時(視細胞密度而定)穩(wěn)定細胞狀態(tài)。接著在倒置顯微鏡下觀察細胞生長情況,并對細胞進行不同倍數(shù)拍照(建議收細胞時就整體外觀拍一張照片,觀察培養(yǎng)基的顏色和是否有漏液情況,隨后在顯微鏡下拍下細胞狀態(tài),100*,200*各一張),觀察記錄細胞在運輸過程中是否有污染情況。作為我方進行銷售依據(jù)。

3.由于細胞狀態(tài)受環(huán)境、操作和運輸?shù)榷喾矫嬉蛩赜绊?,故本公司只保證客戶收到細胞后一周內的細胞狀態(tài),故客戶需要售后時需出示收到細胞的時間證明及客戶提供收貨時間和發(fā)現(xiàn)問題后客服人員溝通的時間證明,期間間隔時間不能大于7天。

4.所有動物細胞均視為有潛在的生物危害性,必須在二級生物安全臺內操作,并請注意防護,所有廢液及接觸過此細胞的器皿需要滅菌后方能丟棄。

 

2011年開始我們致力于在生命科學領域、生物醫(yī)學實驗技術及論文潤色服務,協(xié)助客戶各類實驗服務及論文潤色十余年,是客戶您值得信賴的科研合作伙伴!

如果您受時間、試驗條件等限制而無法完成您的課題研究,歡迎您與我們聯(lián)系。

 

實驗技術服務:

 


滬公網(wǎng)安備 31011802001678號

国产一区二区精品在线| 久久婷婷| 日本a网站| 激情小说亚洲色图| 真人毛片60分钟| 久久午夜福利电影| 无码国产午夜福利片在线观看| 九九九| 国产熟人AV一二三区| 在线成人一区二区| jαpαnesehd熟女熟妇伦| 久久人人爽天天玩人人妻精品| 国产片a国产片免费看视频| 无码中文亚洲AV吉吉影音先锋| 欧美啪啪网站| 久久亚洲精品一区二区| 日韩欧美精品一区二区| 老熟女大战农村熟妇91| 国产综合一区二区| 91久久夜色精品国产网站| 久久99亚洲精品久久| 91一区二区国产精华液| 青青草一区| 日韩成人在线| 白洁少妇陈三52章| 亚洲国产精品久久久久久| 天天欲色| 东北少妇高潮| 麻豆亚洲av熟女国产一区二| 欧美熟妇和黑人巨大xxoo| 国产精品s色| 久久人人爽爽人人爽人人片av | 亚洲欧美日韩综合俺去了| 日本一卡精品视频免费| 国内精品视频在线观看九九| 精品久久久久久天美传媒| 色欲色香天天天综合网www| 亚洲aⅴ天堂av天堂无码麻豆| 18禁超污无遮挡无码免费网站国产 | 亚洲色精品aⅴ一区区三区| 中文字幕在线精品视频入口一区|