細(xì)胞信息表
細(xì)胞名稱 | DC2.4 小鼠樹突狀細(xì)胞 |
種屬 | 小鼠 |
形態(tài) | 上皮細(xì)胞樣 |
培養(yǎng)條件 | 培養(yǎng)基類型：1640培養(yǎng)基 FBS: 10% 抗生素：雙抗 培養(yǎng)條件：37℃，CO2: 5% |
傳代方法 | 收到細(xì)胞后，在倒置顯微鏡下觀察細(xì)胞生長狀態(tài)： 如果沒長滿，將培養(yǎng)瓶用75%酒精消毒后在超凈臺內(nèi)更換新鮮培養(yǎng)液，繼續(xù)培養(yǎng)。 如果細(xì)胞已經(jīng)長滿（約80%-90%）則傳代后繼續(xù)培養(yǎng)。 貼壁細(xì)胞傳代方法： 1 棄去培養(yǎng)基，用不含鈣、鎂離子的PBS洗1-2次。 2 加1ml 0.25%的胰酶（含0.02%EDTA），讓胰酶與大部分細(xì)胞接觸后放入37℃培養(yǎng)箱內(nèi)，隨時觀察細(xì)胞狀態(tài)變化，待細(xì)胞大部分變圓后加*培養(yǎng)基終止消化。 懸浮細(xì)胞傳代方法：可以直接傳代也可以離心法傳代。 1 直接傳代是讓懸浮細(xì)胞慢慢沉淀在瓶底后，將上清吸掉1/2-2/3，吹打細(xì)胞形成細(xì)胞懸液后，分別接種到其他培養(yǎng)皿或培養(yǎng)瓶中繼續(xù)培養(yǎng)。 2離心法傳代是將細(xì)胞連同培養(yǎng)液一并轉(zhuǎn)移到離心管內(nèi)， 1000rpm，5分鐘，去除上清，加新的培養(yǎng)液到離心管內(nèi)，吹打細(xì)胞形成細(xì)胞懸液后，分別接種到其他培養(yǎng)皿或培養(yǎng)瓶中繼續(xù)培養(yǎng)。 一般沒有特殊說明，細(xì)胞一般是一傳二。 |
凍存方法 | 70% *培養(yǎng)基，20%FBS，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配。 儲存：液氮中長期保存。 |
注 | 1 觀察細(xì)胞hao在低倍鏡下觀察，便于整體估計細(xì)胞密度。 2 在運(yùn)輸過程中可能會導(dǎo)致一些貼壁不牢的細(xì)胞發(fā)生部分脫落，可離心吹打后重新種入瓶中培養(yǎng)。 3 收到細(xì)胞后若發(fā)現(xiàn)培養(yǎng)瓶破損、細(xì)胞污染等，請在3天內(nèi)與我們聯(lián)系。 |
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